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數(shù)字PCR也叫DigitalPCR(dPCR),是近幾年發(fā)展起來的一種核酸定量分析技術。相較于傳統(tǒng)熒光定量PCR來說,數(shù)字PCR對結(jié)果的判定不依賴于擴增曲線循環(huán)Ct值,不受擴增效率的影響,能夠直接讀出DNA的分子個數(shù),能夠?qū)ζ鹗紭颖竞怂岱肿佣?。?shù)字PCR基本原理是將一個樣本分成幾十到幾萬份,然后再將其分配到不同的反應單元中,使每個微滴單元包含一個或多個拷貝的核酸分子(即DNA模板),每個單元都會對目標分子進行擴增,然后再對每個單元進行熒光信號的統(tǒng)計并計算。相對而言,傳統(tǒng)PCR或qPCR反應都是發(fā)生于同一體系當中,這也是數(shù)字PCR與其比較大的區(qū)別??:?上海)儀器科技有限公司數(shù)字PCR值得用戶放心。寧夏醫(yī)用數(shù)字PCR代理商
數(shù)字PCR無創(chuàng)產(chǎn)前檢查鐮狀細胞貧血(sicklecellanemia)是HBB基因突變引起的常染色體顯性遺傳病,有嚴重的危害,可以導致高達5%的胎兒死亡率及4.62%的孕婦死亡率。而精細有效的無創(chuàng)產(chǎn)前診斷是預防鐮狀細胞貧血患兒出生的有效方法。研究人員采用dPCR技術檢測孕婦胎兒 游離DNA(cff-DNA)HBB基因突變。結(jié)果顯示,dPCR技術能夠確定87%的男性胎兒(n=45)和75%的女性胎兒(n=20)HBB基因的突變狀態(tài)。當cff-DNA濃度大于7%時,可以**的檢測出HBB基因突變[3],可以說是相當厲害了。重慶經(jīng)濟數(shù)字PCR電話浚和(上海)儀器科技有限公司為您提供數(shù)字PCR,有想法可以來我司數(shù)字PCR!
MicroDrop-100微滴式數(shù)字PCR是具有國內(nèi)自主知識產(chǎn)權的第三代JUE對定量PCR系統(tǒng),整套系統(tǒng)由MicroDrop-100A微滴生成儀、MicroDrop-100B微滴檢測儀以及結(jié)果數(shù)據(jù)分析設備等構成。系統(tǒng)通過自主設計的微流控芯片,利用油水相不兼容的原理,在2分鐘時間內(nèi)將PCR體系分割成100,000油包水的體系,每個體系為的PCR反應體系,體積約為0.2nL,單次實驗一次可生成8個樣本的油包水體系 。由于油包水體系的分割效應,使得數(shù)字PCR受PCRYi制物的影響相對較小,有利于復雜環(huán)境樣本的實驗操作。區(qū)別于熒光定量PCR的過程性判讀方法,數(shù)字PCR結(jié)果判讀為終點法,故其對PCR擴增效率的依賴也相對較小。
數(shù)字PCR(DigtalPCR)是一種核酸定量精密檢測的新興技術手段,于20世紀由Vogelstein等提出。它是將稀釋后的核酸模板分配到大量不同的反應單元中,使每個反應單元中有一個或沒有核酸。利用PCR擴增的同時,加入可檢測熒光。待擴增結(jié)束時,使用統(tǒng)計學方法采集每個反應單元出現(xiàn)的熒光次數(shù),從而定量檢測樣本中的核酸濃度?;诜忠悍绞降牟煌?,數(shù)字PCR主要分為3種:微流體數(shù)字PCR(MicrofluidicdigitalPCR,mdPCR)、微滴數(shù)字PCR(DropletdigitalPCR,ddPCR)和芯片數(shù)字PCR(ChipdigitalPCR,cdPCR)??:?上海)儀器科技有限公司是一家專業(yè)提供數(shù)字PCR的公司,有想法的可以來電數(shù)字PCR!
要了解為什么傳統(tǒng)PCR存在限制,務必要了解PCR反應過程中發(fā)生了什么?;綪CR運行可以分為三個階段:指數(shù)期每個循環(huán)積聚的產(chǎn)物準確加倍(假定**反應效率)。該反應具有高度特異性和精確度。出現(xiàn)指數(shù)式擴增,因為所有試劑均新鮮可用,反應的動力學推動反應有利于擴增子加倍。線性期(高變異性)隨著反應繼續(xù),一些試劑因擴增而被消耗。反應開始減緩,并且每個循環(huán)的PCR產(chǎn)物不再加倍。平臺期(終點:使用傳統(tǒng)方法進行凝膠檢測)反應停止,不再產(chǎn)生更多產(chǎn)物,并且如果放置時間夠長,PCR產(chǎn)物將開始降解。因為每個樣品具有不同的反應動力學,所以每支試管或每個反應將在不同的時間點進入平臺期。在平臺期可以看到這些差異。在平臺期內(nèi),傳統(tǒng)PCR進行測量,又稱為終點檢測。數(shù)字PCR,就選浚和(上海)儀器科技有限公司,用戶的信賴之選,歡迎您的來電哦!重慶經(jīng)濟數(shù)字PCR電話
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